Merhabalar herkeze...
   Benim bir sorum olacakti. Bana sunmam üzerine bir konu verildi. konu Hücre Kültür Tekniklerinin pasajlanmasi ve hücre kültürünün dondurulup çözünme prosedürleri... bunlar üzerine 1 aya yakindir araştırma yapıyorum ama bazi konularda şüphe içinde kaldim.

öncelikle hücreleri pasajlamanin amaci hücre kültürü içerisinde başka kaplara ekim yapmak için hücre ayirmak yanlışım varmi?
şimdi burda 2 sorum var.
1- ""Hücrelerin pasajlanabilmeleri için hücre kültür
flasklarsnkn yüzeyini tamamen kaplamiş
olmalıdır.Böyle flasklara "Konfluent flasklar"
denir."" deniyor. buradaki kaplanma olayi neyin kaplanmasi? hücrelerin üreyerek flasklarin üzerini kaplamasimi? yoksa besi ortamiyla yada farkli bir madde ile kaplanmasimi?.
2- "Hücreler serumdan arındırılmak için PBS ile yıkanar;
serum Tripsin inhibitörlerini içerir.Hücrelere Tripsin
uygulamadan önce mutlaka 1 kere Ca ve Mg
içermeyen PBS ile yıkanmalı ve yüzeylerindeki
serum uzaklaştırılmalıdır." şimdi biz daha hücreye tripsin uygulamadik... neden ca ve mg ekliyoruz? pbs ile yikiyoruz? serum denilen besi ortami+pbs+co2 gibi düzenleyiciler değilmi?

sonra benim uyguladiğim bir teknik mevcut bu yanlişmi?
-hücreleri tripsin/edta ile yüzeyden ayirdiktan sonra bunlari alip Santrifüj tüplerine aktariririm. burda tüplere pbs+mg+ca eklerim ve sanrifüj ederim. üstta kalan pbs ve mineraller altta kalanlar ise tripsin ile karişik hücrelerdir. bunlari sonra alarak ederek ekimini yaparim. olabildiğince küçük yogunlukta alirim ki tripsini daha kolay seyreltiyim. fakat bu üstteki pbs i emdirmek için bi yöntem uygulaniyomuş sanirim? bununla ve santrifujden sonraki tekniklerle ilgili bilginiz varsa bilgilendirirseniz beni sevinirim.

geri kalan sorularimida en yakin zamanda verilen cevaplara göre sorucam... ilgilendiğiniz için çoook teşekkür ederim

sorduğunuz soruları kesın %100 budur dıyemıyeceğim için yardımcı olamıyacağım. bildiklerimi soylerım ama bu sonuçta bilimsel araştırma olduğu için ifade etmek istemiyorum benım mikrobiyoloji kürsüsünde araştırma görevlisi olan sınıf arkadaşım var ona ulaşabılırsem sana yönlendireceğim...

siz bizden önce öğrenırsenız lütfen bizimle paylaşın..çok memnun oluruz..


kolay gelsın iyi çalışmalar