Islak Tesbit Uygulanmış Preparatların Boyanması

[darkfreez]

Islak Tesbit Uygulanmış Preparatların Boyanması

Trikrom Boyama:
Lam kurumadan Shaudinn fiksatifine (SAF) daldırılır ve 30 dk beklenilir daha sonra sırasıyla  % 70'lik alkol (2 dakika), D'Antoni'nin iyot solüsyonu (3-5 dakika), %70'lik alkol (5 dakika), trikrom boya (5-8 dakika), kağıt havlular üzerinde fazla boya süzülür, % 90 asit alkol (3 kez 1'er saniye daldırılır), % 95'lik alkol daldırılır, karbolksilen solüsyonunda çalkalanır, karbolksilen solüsyonu (2-5 dakika) tutulduktan sonra iki ayrı ksilen veya toluen içeren şalede 2-5'er dakika tutulur.

Papanicolaou Boyası (PAP):
Bu teknik içerisinde yaygın olarak kullanılan Hematoksilen & Eozin (H&E) boyamayı ve sitoplazmik boyama metodları olarak da bilinen Orange G (OG 6) ve Eosin Alkol (EA) tekniklerini içermektedir. Hematoksilen & Eozin (H&E) 3 ana teknikle uygulanmaktadır bunlar: • Harris Hematoksilen • Mayer Hematoksilen • Gill Hematoksilen teknikleridir.
Harris Hematoksilen Regresif PAP yönteminde, Mayer ve Gill Hematoksilen Progresif PAP yönteminde kullanılmaktadır.
Modifiye PAP (regresif metod):

• %95 lik etanolde 15 dk tespit
• Musluk suyuna 10 kez daldırma (HİDRASYON)
• Harris hematoksilen 2dk
• Musluk suyuna 10 kez daldırma
• 1-2 daldırma Asit alkol (%1 lik HCl)
• Musluk suyuna 10 kez daldırma
• %95 lik etanole 10 kez daldırma (DEHİDRASYON) (Ayrı şalelerde 2-3 kez aynı işlem)
•OG 2 dk
• % 95 lik etanole 10 kez daldırma (ayrı şalelerde 2-3 kez aynı işlem
•EA-50 veya EA-65 (nonjinekolojik); EA-65 (jinekolojik) 5 dk 
• %95 lik etanole 10 kez daldırma (ayrı şalelerde 2-3 key aynı işelem)
• Kurutma işlemi (Etüv)
• Ksilol 20 kez daldırma
• Entellan ile Kapatma işlemi (ksilen kurumadan)

Modifiye PAP (progresif metod):

• Harris yerine Gill's hematoksilen kullanılır ve 1 dk tutulur
• Regresif yöntemde nükleuslar fazla boyanır ve bu fazlalık dilue asit solusyonu (%1 HCl) ile giderilir.
• Progresif metodda ise nükleuslar istenilen yoğunlukta boyanır ve HCl yerine ''blueing'' solusyonda (amonyum dk hidroksit, lityum karbonat veya Scoot's tap water) 1 tutulur